上海交通大學(xué)來電咨詢梅雨季樣本收集與保存
更新時間:2015-06-09 點擊次數(shù):668
梅雨霽,暑風(fēng)和,高柳亂蟬多。小園臺榭遠池波,魚戲動新荷。又是一年梅雨季,辛苦收集來的ELISA試劑盒樣本該如何保存呢?正好前幾日來自上海交通大學(xué)的徐老師就咨詢的這件事,我司吳熱情解答解答了徐老師的疑問,并整理了一些相關(guān)資料一一播報!
在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃?zhèn)溆?。如有特殊原因需要周期性收集標本,請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1,血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2,血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3,尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4,細胞培養(yǎng)上清:
A、檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細收集上清。
B、檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5,組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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