選擇質(zhì)量優(yōu)良的酶聯(lián)免疫試劑盒,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
加樣可能原因:
1.過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);
2.加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。.酶聯(lián)免疫試劑盒血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
3.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間
酶聯(lián)免疫試劑盒解決辦法:
1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,酶聯(lián)免疫試劑盒采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2.加樣后及時放入孵箱。
3.加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4.如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5.標(biāo)本較多時,請分批操作。
酶聯(lián)免疫試劑盒孵育可能原因:
1.孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),酶聯(lián)免疫試劑盒吸附于孔壁,難于清洗*;
2.孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,酶聯(lián)免疫試劑盒難以清洗*。
解決辦法:
1.貼封片或加蓋;
2.按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
洗板可能原因:
1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2.采用半自動洗板機(jī)洗板時,酶聯(lián)免疫試劑盒洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3.反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
酶聯(lián)免疫試劑盒解決辦法:
1.保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2.合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。