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技術(shù)文章

Technical articles

2023
5-15

ELISA技術(shù)綜述（二）
ELISA的商品化試劑盒成分和分類：在臨床檢驗(yàn)或者科研檢測(cè)中，ELISA實(shí)驗(yàn)通常有商品試劑盒提供。ELISA試劑盒中有三個(gè)必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；（5）酶聯(lián)物（結(jié)合物）及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應(yīng)終止液。1、免疫吸附劑已包被抗原...
2023
5-8

ELISA技術(shù)綜述（一）
ELISA原理ELISA利用抗原抗體之間專一性結(jié)合之特性，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)；由于結(jié)合與固體承載物（一般為塑膠孔盤）上之抗原或抗體仍可具有免疫活性，因此設(shè)計(jì)其結(jié)合機(jī)制後，配合酵素顯色反應(yīng)，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，并可利用顯色之深淺進(jìn)行定量分析。根據(jù)待測(cè)樣品與結(jié)合機(jī)制的不同，ELISA可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方式，主要以"三明治法"(sandwich)、"間接法"(indirect)、以及"競(jìng)爭(zhēng)法"(Competitive)三種為主，以下為各種方法之介紹。ELISA分類見...
2023
5-4

ELISA試劑盒中的抗體
在ELISA試劑盒中運(yùn)用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清，制備較簡(jiǎn)略，但抗血清成分凌亂，除含針對(duì)抗原（多個(gè)表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對(duì)要低于單抗，且制備周期長(zhǎng)，批間差異較大。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位，ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高，且制備技能老練，產(chǎn)量大，批間差異小，但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其缺陷之地址，在雙抗體夾心法中，如包被和指示抗體運(yùn)用同一單抗，則由于結(jié)合位點(diǎn)的短少，簡(jiǎn)略構(gòu)成假陰．性成果。在...
2023
4-24

植物微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T1.2pg/mL-40pg/mL使用目的：本試劑盒用于測(cè)定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中微囊藻毒素LR(MC-LR)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物微囊藻毒素LR(MC-LR)水平。用純化的植物微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物微囊藻毒素LR(MC-LR)，再與HRP標(biāo)記的微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物...
2023
4-19

ELISA中分析非特異性顯色
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)自1971年自問世以來，以其敏感性高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便、安全，而廣泛應(yīng)用于臨床診斷，開創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的新紀(jì)元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會(huì)碰到非特異性問題。1、試劑盒特異性因素1、1固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板最為常見[1]。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別...
2023
4-10

ELISA試劑盒變質(zhì)原因詳解
ELISA試劑盒為什么會(huì)變質(zhì)？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢？一、辦法學(xué)的影響ELISA測(cè)定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其間競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。二、試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量wan全一致，即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)成果也存在差異，因而必須挑選和訂購長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并保證保存條件...
2023
4-3

人組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)ELSIA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T6pg/ml-220pg/ml使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)水平。用純化的人組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)，再與HRP標(biāo)記的組蛋白H3賴氨酸27(H3K27me3)抗體結(jié)合，形成抗體...
2023
3-27

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)靈敏度高的原因
ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析：1選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2）手工操...

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